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工程案例

PCR实验室布局及通风系统设计探讨

2021-03-24

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PCR实验室也叫基因扩增实验室。PCR是聚合酶链反应的简称。它是一种分子生物学技术,用于扩增特定的DNA,可视为特殊的DNA体外复制。用于基因检测,具有灵敏度高、特异性强、快速、简便等特点。它可以将传统方法难以检测到的较少数病毒DNA扩增一百万倍以上,从而大大提高疾病的诊断水平。它不仅可以用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究,还可以用于疾病诊断或任何有DNA和RNA的地方,也称为无细胞分子克隆或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增技术。

1.聚合酶链反应实验室的布局。

聚合酶链反应扩增实验室原则上分为三个独立的工作区:试剂储存与制备区、标本制备区、扩增与扩增产物分析区。为了避免交叉污染,进入每个工作区严格遵循一个单一的方向,即只能从试剂储存和制备区到标本制备区,再到扩增和扩增产物分析区。试剂和样品在实验区之间的转移应通过转移窗口进行。

 

2.PCR实验室实验室空调通风系统的设计及压力控制。

聚合酶链反应实验室对净化水平没有严格要求,但为了避免实验区之间交叉污染的可能性,建议采用全输送、全排放的气流组织形式。同时,要严格控制送风和排风的比例,以保证各个实验区的压力要求。

(1)试剂储存和制备区。

PCR实验室的主要操作是贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合物的制备。用于样品制备的试剂和材料应直接运输到该区域,不得通过其他区域。试剂原料存放在该区域,所需存放的试剂在该区域准备。为了控制气压,这个区域要对外界保持轻微的正压。

(2)标本制备区。

PCR实验室领域的主要操作是样品保存、核酸(RNA和DNA)的提取和储存、扩增反应管的添加和DNA合成的测定。要求该区域的压力梯度相对于邻近区域为正,以避免气溶胶污染从邻近区域进入该区域。此外,采样操作过程中可能会出现气溶胶污染,因此应避免在该区域进行不必要的行走。

(3)扩增和扩增产物分析区。

该领域的主要操作是DNA扩增和扩增片段的测定。此外,将制备好的DNA模板加入(从样品制备区)和将主反应混合物制备到反应混合物中(从试剂储存和制备区)也可以在该区域进行。PCR实验室区域的压力梯度需要相对于邻近区域的负压,以避免气溶胶从该区域泄漏。

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